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液相色譜柱
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沃特世SEC蛋白質分析色譜柱 介紹:SEC蛋白質分析柱體積排阻色譜
體積排阻(又稱凝膠過濾)色譜基于蛋白質在溶液中的體積(流體動力學半徑)而不是分子量對其進行分離,體積較大的物質會在體積較小的蛋白質之前洗脫。這種等度洗脫技術的主要機制基于填充柱中SEC顆粒的孔徑和體積。隨著目標蛋白質的分子量增大,應選用顆粒和孔徑相對更大的SEC色譜柱。
與其它生物分離一樣,在這類要求極為嚴苛的應用中,相較于HPLC色譜柱,使用粒徑更小的UPLC/UHPLC色譜柱可以在更短的時間內實現(xiàn)優(yōu)異的分離度。
沃特世SEC蛋白質分析色譜柱
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HPLC SEC色譜柱基于沃特世亞乙基橋雜化(BEH)顆粒技術和穩(wěn)定的二醇基鍵合技術,相較于傳統(tǒng)的100%硅膠基質SEC產品,具有更的性能。
出色的蛋白質SEC分離性能
蛋白類生物治療藥物的發(fā)現(xiàn)、研發(fā)和質量評估通常需要使用可靠、高分離度的SEC方法。200 Å和450 Å的3.5 µm Xbridge Protein BEH SEC蛋白分析柱是對分子量約10~1500 kDa的蛋白質進行基于HPLC的SEC分離的理想之選。
200 Å和450 Å的XBridge Protein BEH SEC蛋白分析柱裝填二醇基鍵合的3.5 µm BEH SEC顆粒,流速和壓力耐受性優(yōu)于填充5 µm以上顆粒的硅膠基質SEC色譜柱,因此樣品通量更高。
每個生產批次的200 Å和450 Å 3.5 μm Xbridge Protein BEH SEC蛋白分析柱均采用相關蛋白質標準品進行了全面檢測,以確保*的批次間*性,保證經過驗證的方法采集到的數據高度可信。
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UPLC SEC色譜柱分離
ACQUITY UPLC BEH SEC色譜柱經過專門設計,并采用BEH蛋白質標準品進行了QC測試,可確保出色的批次間*性,提高經過驗證的方法的可信度。SEC系列產品是準確測定治療性單克隆抗體中低濃度蛋白質聚集體的理想之選,而且分析速度可達傳統(tǒng)HPLC SEC方法的十倍。相比之下(數據未顯示),BEH C4, 300Å UPLC色譜柱則能夠分離分子量、疏水性和等電點各異的多種蛋白質,同時zui大限度提高回收率并減少蛋白質殘留。
體積排阻色譜柱(硅膠基質)
BioSuite SEC填料的分子量排阻限值主要取決于色譜柱中硅膠基質材料的孔徑。此外,SEC填料的粒徑和色譜柱柱長也是決定分離效率的重要參數。在分離效率方面,BioSuite UHR色譜柱(校準表中未顯示)*,其次是BioSuite HR和標準SEC色譜柱。
Protein-Pak SEC色譜柱中填充硅膠基質、二醇基鍵合的10 µm顆粒,提供60 Å、125 Å和300 Å三種孔徑,非常適用于分析級或實驗室規(guī)模的生物大分子純化。
沃特世建議用戶在色譜柱的整個使用壽命期間適時采用BEH200 SEC蛋白質混合標準品或BEH450 SEC蛋白質混合標準品對基于HPLC的SEC系統(tǒng)進行性能檢查。這些標準品即沃特世對所有SEC色譜柱產品批次進行質控檢測時所用的標準品,其作用如下:
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